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    轉載:大鼠曠場實驗指標檢測及參考值的探討
    點擊次數:1926 更新時間:2020-11-25

    【摘要】 目的 將小動物行為學分析系統用于大鼠曠場實驗,并對測定指標與傳統的評判標準進行相關性分析, 建立曠場實驗中各指標的平均值及 95% 置信區 間。通過對曠場實驗大鼠進行篩選,減少個體差異對結果造成的影響。方法 用小動物行為學分析系統測定分析 3 min 內曠場分析箱中大鼠運動距離和中央區域運動距離,同時記錄大鼠穿 格數與中央區域停留時間。結果 穿格數與運動距離相關性良好( r = 0. 959,P < 0. 01) ,中央區域停留時間與中央區域運動距離相關性良好( r = 0. 915,P < 0. 01) ,建立了各測定指標參考值。結 論 可以用測定運動距離和中央區域運動距離代替傳統的穿格數和中央區域穿格數。

    【關鍵詞】 小動物行為學分析系統;曠場實驗;相關性分析;參考值

    實驗動物的整體自主行為學分析研究在毒理學、精神藥理學、評估藥物和環境對動物行為的改變及對神經系統的作用等領域中廣泛應用。隨著現代計算機技術與圖像分析技術的發展,以此類技術為基礎 的動物自動行為學數據采集分析成為發展的趨勢, 但這些新技術下測定指標與原有的是否一致,新的指標與傳統測定指標間的相關性如何鮮見報道。現進行 大鼠的曠場實驗,對曠場實驗傳統指標與小動物行為記錄分析系統指標進行相關性分析以確立之間的關系并建立其參考值范圍。

    材料與方法

    1. 1 動物 Wistar 大鼠,雄性,SPF 級,體 質 量 180 ~ 220 g,南 方 醫 科 大 學 實 驗 動 物 中 心 提 供,合 格 證 號: SCXK(粵)20060015。

    1. 2 儀器 小動物行為記錄分析系統 ;曠場分析箱木板 100 × 100 × 40 cm(長× 寬 × 高),箱底均分為 25 個方格(20 × 20 cm),內部墻壁涂黑,沿墻格稱為外周區域,其余為中央區域。

    1. 3 測定條件 行為學實驗室保持安靜通風,室內暗光,手術燈照天花板反射到實驗操作區;實驗人員遠離曠場分析箱(以操作角度看不到箱中實驗動物為準)。實驗前,動物在測定房間中適應 10 min 以上。

    1. 4 測定方法 小動物行為學分析系統中將曠場分析箱從左上開始,按左到右順序以不同顏色編號為相同的 25 個小格,其中 7、8、9、12、13、14、17、18 和 19 為中央區域,其余為外周格,13號格為正中格。每次實驗時捏住大鼠尾巴距根部 2 /3 處輕放入 13 號格中,顯示器中觀察其 3 min 內 活 動 情 況,每次測定結束將動物排泄物清除干凈,每只僅測定 1 次。實驗時間結束 錄像分析,軟件統計。

     

    1. 5

    統計學方法 用 SPSS13. 0 統計軟件對各項指標數據進行正態分布檢驗,符合正態分布者用 x珋± 1. 96 s 計算正常參考值范圍,不 符合者,用百分位數法求P 2. 5 ~ P 97. 5 分布范圍。相關分析的雙變量符合正態分布者采 用 Pearson 相 關 分 析,不服從正態分布用Spearman相關分析。

    2 結果

    2. 1 測定指標的平均值

    3 討論

    曠場實驗是將一定面積劃分為不同區域,并以相應的格子對應。大鼠在新環境中是由緊張、興奮、探索 再到適應的一系列過程,興奮性的老鼠在適應的環境中表現為行動活躍,四處走動,留下自身的生物氣息,跨格次數的多少反應其興奮程度。跨格次數的多少與動物的行動量成正比,跨格次數多,活動距離也應增加,但由于局限于當下實驗條件,以往只能用跨格次數從側面反映行動的長短。從 3 個批次實驗結果可知,礦場實驗中動物總運動距離和總穿格數、央區域運動距離與中央區域停留時間都具有良好相關性,重復性好,也證明了他們間的對應關系。現在以大鼠總運動距離等新指標應能更直接地反應動物的興奮程度,從而避免了傳統的人為觀察、手工記錄,所造成標準不一致性、主觀性程度大、費時費力等缺點,也很好的解決了觀察人的行為對實驗動物的“二次應激”的不足,取得更加真實準確的實驗數據。

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